金科大联考2022~2023学年度高三9月质量检测(新教材)语文B答案

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【答案】(10分，除标注外，每空2分)(1)不能(1分)不论农杆菌中是否导入基因D,农杆菌都能在含有该抗生素的培养基上生长(2)2、31、2(3)高渗(1分)植物组织培养。44·【解析】(1)根据目的基因和Ti质粒中的酶切位，点可知，将目的基因导入农杆菌不会破坏农杆菌Tⅰ质粒中的抗生素抗性基因，因此无论农杆菌中是否成功导入基因D,农杆菌都能在含有该抗生素的培养基上生长，即不能用Ti质粒中的抗生素抗性基因来筛选鉴定已经成功导入基因D的农杆菌。(2)由图可知，基因D含有三个酶切位，点，若要保留tms、tmr基因，则使用酶2和酶3切割Ti质粒和目的基因，若要别除tms、tmr基因，则使用酶1和酶2切割Ti质粒和目的基因。(3)用纤维素酶和果胶酶处理两种细胞获得的原生质体没有细胞壁，为了防止原生质体吸水涨破，应将开白花植株的叶肉细胞和开红花植株的叶肉细胞放入高渗溶液中。由一个植物细胞直接培育成完整植株采用的是植物组织培养技术，利用的原理是植物细胞的全能性。

【答案】(10分，除标注外，每空1分)(1)限制neo'基因基因X的内部和neo'基因的两端产生相同的黏性末端，便于被DNA连接酶连接(2)发育的全能性显微注射在培养基中加入新霉素和DHPG,培养导入置换载体的细胞未成功导入的ES细胞中不含n0'基因，不抗新霉素，所以在培养基中无法存活；成功导入但发生非同源重组的ES细胞中，HSV-tk基因可以表达，其产物会将培养基中的DHPG转化为有毒物质从而杀死ES细胞；只有发生同源重组的细胞，含有neo'基因，同时无HSV-t基因，可以在培养基中存活(2分)》(3)受体对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应【解析】(1)在制备置换载体时，要将no'基因（新霉素抗性基因）作为置换基因X的插入突变，因此在构建基因X的置换载体时，需用相同的限制酶处理基因X和neo'基因，使它们形成相同的黏性末端。由图可知，no'基因需要插入到基因X的内部，并且在no'基因外侧添加HSV-tk基因，所以该酶的酶切位，点应位于基因X的内部和no'基因的两端，该过程中用相同的限制酶切割的目的是获得相同的黏性末端，便于被DNA连接酶连接。(2)ES细胞具有发育的全能性。置换载体导入动物细胞时常用显微注射技术，导入置换载体后的ES细胞需要进行筛选，此时存在三种类型的细胞：未成功导入置换载体的ES细胞、成功导入置换载体并发生非同源重组的细胞、成功导入置换载体并发生同源重组的细胞。在未成功导入置换载体的ES细胞中，不含no'基因，不抗新霉素，根据no'基因和HSV-t坎基因的作用可知，若培养基中添加新霉素，此种细胞不能存活；在成功导入置换载体并发生非同源重组的ES细胞中，根据图乙可知，HSVt坎基因可以正常表达，所以在培养基中加入DHPG后，HSVk基因的表达产物会将DHPG转化为有毒物质杀死ES细胞，此种细胞不能存活；而在成功导入置换载体并发生同源重组的ES细胞中，不再含有HSV-基因，所以在此培养基上能正常生存。因此要将成功导入置换载体并发生同源重组的ES细胞筛选出来，可以在培养基中加入新霉素和DHPG。(3)将嵌合体胚胎移植到受体小鼠体内并能在受体小鼠体内存活的原因实际上就是胚胎移植成功的原理，即受体子宫对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。