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2021-2022年100所金典卷生物第7题答案
(3)根据题干信息可知,过程③中获取的目的基因是(正常的)Rag2基因,若要将目的基因导入受体细胞,需要构建含(正常的)Rag2基因的基因表达载体,构建之前可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列(或碱基对序列)设计引物,利用PCR技术对目的基因进行扩增;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因,可采用DNA分子杂交技术
(4)按此方法和图示技术流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及基因工程技术(包括PCR技术)、动物细胞培养技术,其中基因工程涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶,动物细胞培养技术涉及的酶有胰蛋白酶,PCR技术涉及的酶有耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。检测Rag2基因的表达情况,可采用抗原抗体杂交法,即提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。