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9.C【解析】①步骤表示倒平板,在倒平板之前培养基已经调节过pH并灭过菌,A正确;①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染,B正确;接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌,所以③到④的过程中5次划线操作前都要灼烧灭菌,接种结束后还需灼烧灭菌1次,防止造成污染,由此可见,③到④的过程中共需灼烧接种环6次,C错误;④步骤操作时,不能将第1区和第5区的划线相连,D正确。
14.D【解析】一般采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,A正确:菌液经过连续划线,菌液中的细菌会越来越少,最终会获得单个细菌形成的菌落,B正确:每次划线前后都需要将接种环灼烧灭菌,因此按照图中划线顺序,整个划线过程需要对接种环灼烧5次,C正确;每次划线的菌种来自上一区域的末端,因此划线的起始区域菌落最多,由图乙可推知,图甲中的d区域菌落多,为划线的起始位置,D错误。