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25.(共15分,除标注外,每空2分)(1) EcoR I和 BamH I目的基因不被破坏,防止自身环化和反向连接(3分)(2)通过PCR技术扩增目的基因DNA复制要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)秋水仙素可能为杂合子,发生性状分离【命题意图】本题考查基因工程的相关知识,意在考查考生运用所学知识解决实际问题的能力。【解析】(1)由题图可知,要将目的基因与运载体连接,选用EoRI和 BamH I这两种酶,可以防止自身环化和反向连接,且目的基因不会被破坏。(2)获取目的基因的方法很多常用的三种方法为从基因文库中获取、通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成、通过PCR技术扩增目的基因,其中PCR技术的原理是DNA的复制。PCR技术的前提是要有段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物。(3)单倍体植株的染色体要想加倍,常用秋水仙素处理,筛选获得的目的植株的基因是纯合子,而思路1得到的受精卵细胞可能为杂合子,会发生性状分离