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38.(15分,除标注外每空1分)(1)逆转录(酶)PCR(聚合酶链式反应)(2分)(2) Nco Nhe I防止S基因自身环化、防止S基因与运载体反向连接(合理即可,2分)(3)⑤(2分)蔗糖(2分)(4)抗原无有SARS-CoV-2感染史的志愿者血清中会存在一定量的相应抗体对试验结果产生干扰(2分)【解析】(1)利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录,起作用的酶为逆转录酶,在体外将DNA扩增的技术是PCR(聚合酶链式反应)(2)NcoI的识别切割位点为C↓ CATGG,Nhel的识别切割位点为G↓ ATCC,C分子的两端为一GATC和OTAC-,根据碱基互补配对原则,可知需要用限制酶NcoI、NheI切割质粒B。由于同种限制酶切割得到的两端黏性末端相同,用DNA连接酶连接时可出现S基因自身环化以及S基因与运载体反向连接的现象,所以常选用两种限制酶对新冠病毒的S基因进行切割,目的是防止S基因自身环化、防止S基因与运载体反向连接。(3)图中表示筛选的过程是⑤(筛选含重组质粒的P型酵母菌)。标记基因SUC2控制合成蔗糖酶,使P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存,筛选时应使用以蔗糖为唯一碳源的培养基。(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作为抗原,刺激机体产生特异性免疫过程,机体免疫系统产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。参加临床试验的志愿者需要满足无SARS-CoV-2感染史,即未感染过新冠病毒的志愿者,因为感染过新冠病毒的人体内含有对新冠病毒的记忆细胞,若注射疫苗会出现二次免疫的特征,即体内的记忆细胞会迅速增殖分化产生大量的浆细胞,浆细胞合成并分泌大量的抗体,从而导致无法检测出该疫苗的真正效果,更多内容,请微信搜索关注。