广东省广州市海珠区2021-2022学年高一下学期期末考试生物试题答案

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25.(共12分，每空2分)(1)引物B和引物C耐高温的DNA聚合酶（或Tag酶)3(2)MunI和XhoI(3)检测和筛选质粒是否导入受体细胞能发出荧光但在四环素培养基中不能生长【命题意图】本题考查基因工程操作流程的相关知识，意在考查考生的理解能力和获取信息的能力。【解析】(1)由于DNA聚合酶只能将单个的脱氧核苷酸加到引物的3'端，A、B引物向左延伸子链，C、D引物向右延伸子链，因此为了扩增出中间的钾离子通道基因，可以利用的引物是题图中的引物B和引物C,此过程中还需要的酶是耐高温的DNA聚合酶。根据PCR扩增的特点，至少需要经过3轮扩增，这样才能出现仅含目的基因的序列。(2)为了将获取的钾离子通道基因准确连接在载体的启动子和终止子之间的区域，载体上仅有MunI、EcoR I和XhoI三种酶切位点，选择EcoR I会同时破坏荧光蛋白基因和四环素抗性基因，因此只能选择在目的基因两端添加MunI和XhoI限制酶的切割位点，且用这两种酶酶切后获得的黏性末端不互补，能够防止出现目的基因与载体反向连接和自身环化现象。(3)载体上荧光蛋白基因的作用是检测和筛选质粒是否导入受体细胞。在将重组质粒导入农杆菌的过程中，成功导入目的基因的农杆菌细胞含有荧光蛋白基因，会发出荧光，但是插入目的基因时破坏了四环素抗性基因，因此在四环素培养基中不能生长。A易错警示(I)引物的选择：由于耐高温的DNA聚合酶不能从头开始合成子链，因此PCR扩增过程中必须设计引物，耐高温的DNA聚合酶只能将单个的脱氧核昔酸加到引物的3'端，再根据DNA总是反向平行的，准确判断引物的3'端和5'端，以及子链延伸的方向，从而准确选择合适的引物。(2)限制酶的选择：若选择同一种限制酶或者黏性末端的缺口处碱基能互补配对的不同限制酶，经DNA连接酶处理后可能会出现载体或目的基因自身环化或者目的基因与载体反向连接的情况，因此为了准确连接目的基因和载体，通常选择不同的限制酶（而且黏性末端碱基不互补)切割，另外同时需要考虑限制晦是否会破坏目的基因、标记基因或启动子等组件。

4.C【解析】单细胞蛋白是指蛋白质含量高的微生物菌体，不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质，A正确；目前，许多国家以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得了大量的微生物菌体，即单细胞蛋白，B正确；利用酵母菌等生产的单细胞蛋白还可以作为食品添加剂，C错误；在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，可使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力，D正确。