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10.B【解析】使用限制酶是为了切割目的基因和运载体,不需要解旋酶解开双螺旋,A项错误;限制酶1和限制酶3切出的黏性末端相同,都是一CTAG,B项正确;限制酶1、2识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成限制酶3、4识别的序列是由6个脱氧核苷酸组成,C项错误;限制酶1和限制酶2切割形成的DNA片段的黏性末端不同,前者是一CTAG,后者是—CATG,不能通过T4DNA连接酶拼接,D项错误。,更多内容,请微信搜索关注。