2024年陕西省初中学业水平考试信息卷(C)答案(生物)

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20/44(I)Cas9蛋白和SgRNA是基因组编辑工具（图1），为筛选进行高效编辑的sgRNA,需根据基因相应序列，设计并合成多个sgRNA链。分别构建sgRNA/Cs9表达质粒，并通过法导入CHO细胞餐野生型12345与目襟别互补2000bp9800500b250b100bp图1图2(2)Cs9蛋白与靶序列结合并将DNA双链切断，随后细胞会通过DNA损伤修复机制，将断裂处两端的序列连接起来，但在缺口处会发生碱基错配。T酶能特异性识别并切割错配的双链DNA,通过T酶的酶切实验检测sgRNA在CHO细胞内编辑效率。对图2电泳结果分析，组实现sgRNA的高效编辑。(3)将含目的基因表达框和sgRNA/Cs9表达质粒(1：1)共转染CHO细胞，实现同步敲入敲除基因，具体过程如图3。目的基因表达框从同源序列2A可源序列列一8一可序列同源序☐一儿同源定向修复同源序列如2同源序列☐一4768图3①目的基因表达框中含基因表达所需的元件，元件顺序依次为：同源序列I-同源序列川(从下列选项中选取合适元件并填入对应字母即可)，（填对应元件选项字母）元件导致FUT8基因靶点后序列没有成功转录。a、T2A(连接子)b、启动子c、转录终止信号元件d、Bcl-2基因e、FUT8基因f、绿色荧光蛋白基因②选取能发出的细胞，进一步提取基因组DNA,并对图3中片段1、2、3进行PCR,筛选出在FUT8靶基因处成功整合目的基因表达框的单克隆细胞。若PCR扩增产物的电泳结果出现长度约的（明亮）单一条带，表明筛选出的单克隆细胞为成功定点整合的纯合细胞。(4)CHO细胞是基因工程中生产抗体的常用受体细胞，但其中FUT8负责将岩藻糖转移至表达抗体上，而岩藻糖的存在会极大地降低抗体的作用。经过改造后的CHO细胞株进行抗体生产的优势是改造后的CHO细胞株具有基因不易发生，利于进行抗体的大规模生产：同时其生产的抗体无修饰，利于发挥抗体的作用。高三年级生物科试卷第10页，共10页